Bt基因核酸檢測試劑盒是針對轉基因抗蟲作物中廣泛使用的cry1Ab、cry1Ac等Bt靶標基因開發的檢測試劑,核心采用熒光PCR法,可快速篩查樣本中是否含有轉基因抗蟲成分,僅用于科研場景,不可用于臨床診斷。
一、核心基礎信息
檢測靶標:以蘇云金芽孢桿菌來源的cry1Ab、cry1Ac基因為核心檢測對象,覆蓋玉米、水稻、棉花等常見轉基因抗蟲作物。
適用樣本:可檢測農作物植株、米粉、面粉、豆制品、米制品、嬰幼兒輔食、罐頭食品、植食性飼料等多種基質的樣本。
性能參數:檢測限低至0.1%(質量分數),部分高靈敏度款可達10拷貝/反應,能識別微量的轉基因摻雜,特異性強,可區分高度同源的基因序列。
保存條件:需在-20℃避光密封保存,避免反復凍融,常規規格為48T或50T,不同品牌產品有效期多為12個月。
二、操作與結果判讀
樣本制備:從待檢樣本中提取基因組DNA,保證DNA純度達標、濃度適宜。
試劑配制與加樣:將DNA模板加入預混的PCR反應液中,同步設置陰性對照(無菌水)和陽性對照(含Bt基因的質粒)。
擴增程序:95℃預變性5-10分鐘,隨后40個循環:95℃15秒→60℃30-60秒(收集熒光)。
結果判定:Ct值≤35-36且擴增曲線呈典型S型為陽性;Ct值≥40或無Ct值為陰性;Ct值在36-40區間為可疑,需重復檢測確認。
三、關鍵注意事項
Bt基因核酸檢測試劑盒該試劑盒屬于初篩類試劑,若檢測結果為陽性,需進一步使用品系特異性試劑盒確認具體的轉基因品系。
操作需嚴格分區,使用帶濾芯的吸頭,實驗結束后用10%次氯酸或75%酒精對工作臺進行消殺,避免氣溶膠污染導致假陽性結果。
不同批號的試劑不可混合使用,需在有效期內完成檢測,實驗產生的廢棄物需按生物安全規范妥善處理。